بخشی از چكيده:دسفري اكسامينB، تنها سيدروفوري است كه فرم مزتيله آن (نمك متان سولفونات دسفري اكسامين B) با نام تجاري دسفرال جهت درمان بيماران تالاسمي، به منظور شلاته كردن بار اضافي آهن، استفاده مي گردد.
به همين منظور جهت توليد دسفري اكسامين B، از سويه استرپتومايسس پيلوسوس استفاده گرديد و سويه مربوطه در محيط كشت Soy bean كشت داده شد و دسفري اكسامين آن بوسيله استفاده از محلول فنل- كلروفرم و اتر استخراج گرديد. به منظور طراحي اين سيستم بيولوژيكي و افزايش بهره برداري از محصول مذكور از منابع كربن و نيتروژن مختلف استفاده گرديد و تاثير هر يك بر ميزان دسفري اكسامين توليدي بررسي شد. چنانچه مشاهده گرديد كه اسيد آمينه ترئونين، افزايش قابل ملاحظه اي بر دسفري اكسامين توليدي از سويه مذكور دارد و مقدار %125/0 ترئونين، در محيط كشت Soy bean، بسيار مطلوب مي باشد. از طرفي اثر ويتامين تيامين (B1)بررسي گرديد و مشاهده شد كه تاثير مثبت بر دسفر اكسامين توليدي دارد و در رده بعد از اسيد آمينه ترئونين قرار مي گيرد. همچنين اثر اسيد آمينه لوسين نيز بر توليد دسفري اكسامين مثبت بوده و در رده بعد از ويتامين تيامين (B1) قرار مي گيرد.
فهرست مطالب:چكيده
مقدمه
فصل اول1-1 - تالاسمي
1-2-اتيولوژي و سبب شناسي تالاسمي
1-2-1 - خون شناسي
1-2-2- خون سازي و گلبولهاي قرمز
1-3- تالاسمي و انواع آن
1-3-1 آلفا تالاسمي
1-3-2- بتا تالاسمي
1-3-2-1 بتا تالاسمي مينور(سالم ناقل)
1-3-2-2 – بتا تالاسمي ماژور( بيماري تالاسمي)
1-3-2-3-بتا تالاسمي بينابيني
1-4- تشخيص تالاسمي
1-5- درمان تالاسمي
1-6- فيزيولوژي عنصر آهن و اهميت آن در بدن انسان
1-6-1- مسموميت حاد آهني
1-7- دسفرال
1-7-1- نحوه استفاده از داروي دسفرال
1-7-2-كاربردهاي داروي دسفرال در پزشكي
1-7-3- عوارض ناشي از داروي دسفرال
1-7-4- اقدامات احتياطي در مورد داروي دسفرال
1-7-5- ملاك توقف درمان بوسيله دسفرال
فصل دوم2-1- سيدرو فورها
2-1-1- هيدروكسامات ها
2-1-2-فنولات ها يا كاتكولات ها
2-2- دسفري اكسامين ها
2- 2-1 – ساختمان دسفري اكسامين
2-2-2- دسفراكسامين بصورت آنتي اكسيدان
2-2-3 – خصوصيات فيزيكو و شيميايي دسفراكسامين
2-2-4- مكانيسم دسفراكسامين در جلوگيري از بيماريهاي با بار اضافي آهن
2-2-5- تشكيل راديكال DFO nitroxide
2-3- دسفري اكسامين B
2-3-1- بيوسنتر دسفري اكسامين B
2-3-2- ژنهاي كد كننده دسفري اكسامين B
2-4- توليد كننده¬هاي دسفري اكسامين
2-5- اهميت آهن بر روي ميكروارگانيسمها
2-6- مكانيسم عمل سيدروفورها در ارتباط با انتقال آهن به درون سلول ميكروارگانيسمها
2-7- توليد، استخراج و تخليص دسفري اكسامين B
فصل سوم3-1- اكتينوميست ها
3-2- استرپتومايسس ها
3-2-1- پاتولوژي
3-2-2 – مرفولوژي و ساختمان
3-2-3- مشخصات كلني
3-2-4- اسپورزايي
3-2-5- تركيبات پوشش سلولي
3-2-6- تغذيه و فاكتورهاي موثر بر رشد و خصوصيات فيزيكوشيميايي
3-2-6-1- تغذيه
3-2-6-2- اكسيژن
3-2-6-3 - رطوبت
3-2-6-4- دما
3-2-6-5- pH
3-2-6-6- اكولوژي
3-2-6-7- بيولوژي توسعه يافته استرپتومايسس
3-2-7- انواع فرآورده هاي ميكروبي
3-2-7-1- متابوليت هاي اوليه
3-2-7-2- متابوليت هاي ثانويه
3-2-7-2-1- آنتي بيوتيك ها
3-2-7-2-1-1- فيزيولوژي و تنظيم توليد آنتي بيوتيك
3-2-7-3- آنزيمها
3-2-7-3-1- پروتئازها
3-2-7-3-1-1- پروتئازهاي اسيدي
3-2-7-3-1-1-1- رنين
3-2-7-3-1-2- پروتئازهاي خنثي
3-2-7-3-1-3- پروتئاز های قلیایی
3-2-7-3-1-3-1- فرآیند تخمیر پروتئازهای قلیایی
3-2-7-3-1-3-2- تعیین فعالیت پروتئاز قليايي
3-2-7-3-1-4- بازدارنده های فعالیت آنزیم پروتئاز وشلاته کننده ها
3-2-7-3-1-5- تجزیه
3-2-7-3-1-6- پروتئاز ها و استرپتومایسسها
3-2-8- محيط كشت تخمیر صنعتی
3-2-8-1- نيازهاي غذايي ميكروارگانيسمها
3-2-8-1-1- كربن
3-2-8-1-1-1- منابع کربن و استرپتومایسس ها
3-2-8-1-2-نيتروژن
3-2-8-1-2-1- منابع نيتروژن و استرپتومايسس ها
3-2-8-1-3- هيدروژن و اكسيژن
3-2-8-1-4- مواد معدني
3-2-8-2-تنظيم كننده هاي متابوليكي
3-2-8-3- ضد كف ها
3-2-9- بیوسنتز در استرپتومايسس ها
فصل چهارم4-1- دستگاه هاي مورد استفاده
4-2- وسايل مورد استفاده
4-3 - محيط هاي كشت مايع براي رشد باكتري
4-4- محيط هاي كشت جامد براي رشد باكتري
4-5- محيط هاي جامد براي توليد اسپور
4-6- مواد لازم جهت رنگ آميزي گرم
4-7- مواد لازم جهت استفاده از ميكروسكوپ نوري
4-8- محيط مورد استفاده جهت شناسايي كيفي دسفري اكسامين: محيط Des4
4-9- محيط مورد استفاده جهت اندازه گيري توليد دسفري اكسامين محيط Soy bean
4-10- مواد لازم جهت نگهداري و ذخيره باكتري ها
4-11- معرف هاي دسفري اكسامين
4-12- مواد لازم جهت رسم منحني استاندارد دسفري اكسامين B
4-13- مواد لازم جهت استخراج دسفري اكسامين
4-14- مواد لازم جهت تهيه محلول Lysing Buffer
4-14-1 – مواد لازم جهت تهيه محلول Tris Hcl
4-15- محلول كازئين %5/0 دربافر فسفات
4-15-1- بافر فسفات (PBS)
4-16- محلول لوري (Lowry)
فصل پنجم5- ١- تهيه و آماده سازي سويه استرپتومايسس پيلوسوس
5 ـ ٢ ـ بررسي خصوصيات مرفولوژيكي سويه استرپتومايسس پيلوسوس
5-٢-١- خصوصيات ماكروسكوپي
5- ٢-١-١- كشت استرپتومايسس پيلوسوس بر روي محيط جامد
5-٢-١-٢- كشت استرپتومايسس پيلوسوس در محيط مايع
5-٢-٢ خصوصيات ميكروسكوپي
5-٢-٢-١- تهيه لام از محيط كشت جامد
5-٢-٢-٢- تهيه لام از محيط كشت مايع
5ـ ٢ـ٢ـ ٣ـ رنگ آميزي گرم
5 ـ ٣ـ تهيه مايع تلقيح
5 ـ ٣ـ ١ـ تهيه محيط ذخيره
5 ـ ٣ـ ٢ـ تهيه سوسپانسيون اسپور
5ـ ٤ـ رسم منحني رشد استرپتومايسس پيلوسوس
5ـ ٥ـ بررسي تغييرات pH در محيط كشت Soybean
5ـ ٦ـ توليد دسفري اكسامين توسط استرپتومایسس پيلوسوس
5ـ ٦ـ ١ـ تشخيص كيفي دسفري اكسامين
5ـ ٦ـ ٢ـ سنجش ميزان توليد دسفري اكسامين در هر روز
5-6-3- رسم منحني استاندارد دسفرال
5-٧ـ استخراج دسفري اكسامين بوسيله فنل-كلروفرم
5 ـ ٧ـ ١ـ مزتیله كردن دسفري اكسامين
5-8- تعيين وجود دسفري اكسامين B در ماده استخراج شده
5ـ ٩ـ بهينه سازي محيط كشت توليد دسفري اكسامين
5ـ ٩ـ ١ـ بررسي اثر اسيد آمينه ترئونين بر توليد دسفري اكسامين
5 ـ ٩ـ ١ـ ١ـ بررسي اثر اسيد آمينه ترئونين بر توليد دسفري اكسامين در يك محدوده غلظت
5ـ ٩ـ ٢ـ بررسي اثر اسيدآمينه ترئونين و اسيد آمينه لوسين و ويتامين تیامینB1) ( برتوليد دسفري اكسامين
5 ـ ٩ـ ٣ـ بررسي گلوكز و ملاس و سوكروز بر توليد دسفري اكسامين
5ـ ٩ـ ٤ـ بررسي اثر شلاته كننده هاي كاتيون بر تولید دسفری اکسامین
5 ـ ٩ـ ٥ـ استفاده از محيط كشت عصاره مخمر به جاي استفاده از محيط كشت Soybean
5 ـ ٩ـ ٦ـ بررسي اثر مواد معدني مختلف بر ميزان توليد دسفري اكسامين
5 ـ٩ـ٦ـ١ـ بررسي تاثير مواد معدني در غلظت هاي مختلف بر ميزان توليد دسفري اكسامين
5 ـ ١٠ - بررسي پروتئاز توليدي از استرپتومايسس پيلوسوس در حضور شلاته كننده ها و مواد معدني مختلف
5 ـ ١٠ـ ١ـ كشت باكتري و سنجش پروتئاز
5 ـ ١٠ـ 2ـ تخليص كازئين
فصل ششم6ـ ١ـ بررسي خصوصيات مرفولوژيكي ماكروسكوپي استرپتومایسس پيلوسوس
6ـ ١ـ ١ـ خصوصيات ماكروسكوپي سويه استاندارد بر روي محيط كشت جامد
6 ـ ١ـ٢ـ خصوصيات ماكروسكوپي سويه استاندارد در محيط كشت مايع
6 ـ ٢ـ بررسي خصوصيات مرفولوژيكي ميكروسكوپي استرپتومایسس پيلوسوس
6 ـ٣ـ رسم منحني رشد استرپتوماسيس پيلوسوس در محيط كشت MYB
6-4- رسم منحني pH بر حسب زمان در محيط كشت Soybean حاوي سويه استرپتومايسس پيلوسس
6 ـ ٥ـ تشخيص كيفي و كمي دسفري اكسامين توليدي
6-5-1- تشخيص كيفي و توليد و يا عدم توليد دسفري اكسامين
6ـ٥ـ2ـ رسم نمودار استاندارد دسفرال
6ـ٥ـ3ـ میزان دسفري اكسامين توليدي در هر روز توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس در محيط Soy bean
6-6- نتايج مربوط به استخراج دسفري اكسامين توليد شده توسط سويه استرپتومايسس پيلوسوس
6-6-1- نتايج مربوط به تأييد وجود دسفري اكسامين B در ماده استخراج شده
6-7- بهينه سازي محيط كشت توليد دسفري اكسامين
6-7-1 بررسي اثر اسيد آمينه ترئونين بر توليد دسفري اكسامين
6-7-1-1- بررسي اثر اسيد آمينه ترئونين بر توليد دسفري اكسامين در يك محدوده غلظت
6ـ7ـ ٢ـ بررسي اثر اسيد آمينه هاي ترئونين و لوسين و ويتامين تيامين (B1 )
6 ـ 7ـ٣ـ بررسي گلوكز ، ملاس، سوكروز بر توليد دسفري اكسامين
6ـ 7ـ ٤ـ بررسي اثر شلاته كننده هاي كاتيون بر ميزان توليد دسفري اكسامين
6ـ 7ـ ٥ـ استفاده از محيط كشت عصاره مخمر به جاي استفاده از محيط كشت Soybean
6 ـ 7ـ ٦ـ بررسي اثر مواد معدني مختلف بر ميزان توليد دسفري اكسامين
6 - 7 - 6 - 1- بررسي اثر مواد مختلف با غلظت متفاوت بر ميزان توليد دسفري اكسامين
6ـ8ـ بررسي پروتئاز توليدي از استرپتومايسس پيلوسوس در حضور شلاته‌كننده و مواد معدني مختلف
فصل هفتم- بحث و نتيجه گيري
- پيشنهادات
- فهرست منابع
برچسب ها:
تحقیق توليد داروي دسفرال پایان نامه توليد داروي دسفرال پروژه توليد داروي دسفرال ارزيابي توليد داروي دسفرال تولید دسفرال از استرپتومايسس پيلوسوس روش بيولوژيك تولید دسفرال استرپتومايسس پيلوسوس پروژه بيوتكنولوژي تولید دارو